植物(wu)中粗(cu)脂(zhi)肪檢(jian)測方(fang)案(an) -索氏(shi)提(ti)取法

原理:

索氏提取法的(de)原(yuan)理是將樣(yang)品(pin)置(zhi)於(yu)索氏脂(zhi)肪抽提器中(zhong),反(fan)復(fu)經(jing)乙(yi)MI(或石(shi)油(you)醚(mi))抽提，使脂(zhi)肪溶解於(yu)溶劑中，然(ran)後(hou)加(jia)熱(re)除去溶劑，稱重(zhong)，即(ji)可算出(chu)樣品(pin)中(zhong)粗(cu)脂(zhi)肪百(bai)分(fen)含量(liang)。由(you)於(yu)樣品(pin)中(zhong)類(lei)脂(zhi)物(wu)質(zhi)亦(yi)溶解於(yu)此溶劑中，故(gu)稱粗(cu)脂(zhi)肪含量(liang)，也(ye)是國際(ji)標(biao)準推薦(jian)法(fa)，仲裁時(shi)以(yi)此(ci)油(you)重(zhong)法(fa)為(wei)準。本法(fa)所(suo)得結果(guo)準確、穩(wen)定，其缺(que)點(dian)是費(fei)時，壹(yi)般(ban)須10小時以上，而(er)且(qie)壹套儀(yi)器只能(neng)測定壹個(ge)樣品(pin)，不(bu)適(shi)於(yu)大批(pi)樣品(pin)的(de)分(fen)析(xi)。

主(zhu)要(yao)儀(yi)器:

(1)分(fen)析(xi)天平:感(gan)量(liang)0.0001g

(2)粉碎機(ji)、研缽(bo)、切(qie)片機(ji)

(3)電(dian)熱式恒(heng)溫(wen)水浴(yu):6或8孔式(shi))。

(4)烘(hong)箱。

(5)濾(lv)紙(zhi)筒(tong):直徑(jing)22mm,長100mm。

(6)裝有(you)變色(se)矽(gui)膠(jiao)的(de)幹(gan)燥器。

試(shi)劑(ji):

無水乙(yi)MI:化學純(chun)。

操作(zuo)步(bu)驟(zhou):

(1)樣品(pin)的(de)選取和(he)制備(bei):選取有(you)代(dai)表性(xing)的(de)油(you)料種子，揀出(chu)雜質(zhi)，按(an)四(si)分(fen)法縮(suo)減取樣。小粒種子，如(ru)芝麻(ma)、油(you)菜等，取樣量(liang)不(bu)得少(shao)於(yu)25g;大粒(li)種子如(ru)大豆(dou)、花生仁(ren)等，取樣量(liang)不(bu)得少(shao)於(yu)30g。大豆(dou)經105±2℃烘(hong)幹1小時後(hou)取出(chu)，放(fang)入幹燥器內(nei)冷(leng)卻至(zhi)室(shi)溫(wen)。粉碎，並通過40目(mu)篩(shai);花生仁(ren)切(qie)碎。帶(dai)殼油(you)料種子，如(ru)花生果(guo)，蓖麻籽，向日(ri)葵籽(zi)等，需(xu)將(jiang)殼(ke)與(yu)籽(zi)粒分(fen)開，分(fen)別(bie)稱量(liang)，計(ji)算(suan)出(chu)仁(ren)率(lv)。然(ran)後(hou)測定籽粒(li)的(de)油(you)分(fen)。制備(bei)完畢(bi)，立即(ji)混合均(jun)勻(yun)，裝入磨口瓶中(zhong)備(bei)用。

(2)研(yan)磨與(yu)稱(cheng)樣:稱取備(bei)用樣(yang)品(pin)2-4g兩(liang)份，(含油(you)0.7-1.0g)，準確至(zhi)0.001g。置(zhi)105±2℃烘(hong)箱中(zhong)幹燥1小時，取出(chu)，放(fang)入幹燥器內(nei)冷(leng)卻至(zhi)室(shi)溫(wen)。同時測試樣的(de)水(shui)分(fen)。將試(shi)樣(yang)在研缽(bo)內(nei)研(yan)細，將研(yan)細的(de)試(shi)樣移(yi)入已幹燥的(de)濾(lv)紙(zhi)筒(tong)，取少(shao)量(liang)脫(tuo)脂(zhi)棉(mian)蘸(zhan)乙(yi)MI擦(ca)凈(jing)研(yan)缽(bo)、研桿(gan)和(he)牛角勺上的(de)樣(yang)品(pin)和(he)油(you)跡(ji)，壹(yi)並投(tou)入濾紙(zhi)筒(tong)內(nei)(大豆(dou)已預(yu)先烘(hong)幹粉碎可直接(jie)稱(cheng)樣(yang)裝筒(tong))，在試樣(yang)面層(ceng)塞(sai)以(yi)脫(tuo)脂(zhi)棉(mian)，以(yi)防樣(yang)品(pin)損(sun)失，將(jiang)濾紙(zhi)筒(tong)投(tou)入抽提管內(nei)。每(mei)個(ge)抽提器只放(fang)壹個(ge)單樣。

(3) 在裝有(you)2--3粒沸(fei)石(shi)並已(yi)烘(hong)至恒(heng)重(zhong)的(de)潔(jie)凈的(de)抽提瓶內(nei)，加(jia)入約瓶體(ti)積1/2的(de)無水乙(yi)MI，把(ba)抽提器各(ge)部分(fen)連(lian)接(jie)起(qi)來(lai)，連(lian)接(jie)好(hao)冷(leng)凝水(shui)流(liu)，調節(jie)水(shui)浴(yu)溫(wen)度(du)，使(shi)冷(leng)凝(ning)下(xia)滴(di)的(de)乙(yi)MI速(su)度(du)180滴(di)/分(fen)(水浴(yu)溫(wen)度(du)約(yue)在55℃以下(xia))谷物(wu)、大豆(dou)樣品(pin)抽提8小時，壹般(ban)油(you)料抽提10小時，有(you)些含油(you)量(liang)很(hen)高(gao)的(de)油(you)料種子，應延長抽提時間，直到(dao)抽提管內(nei)的(de)乙(yi)MI用濾(lv)紙(zhi)試(shi)驗無油(you)跡(ji)時(shi)為(wei)止(zhi)。

(4)抽提完畢(bi)後(hou)，從抽提管中(zhong)取出(chu)濾紙(zhi)筒(tong)，再連(lian)接(jie)好(hao)抽提器，在水浴(yu)上蒸(zheng)餾(liu)回收(shou)抽取瓶中(zhong)的(de)乙(yi)MI。然(ran)後(hou)取出(chu)抽提瓶，在沸(fei)水(shui)浴(yu)上蒸(zheng)去(qu)殘(can)余的(de)乙(yi)MI。

(5)將盛(sheng)有(you)粗(cu)脂(zhi)肪的(de)抽提瓶放(fang)入105±2℃烘(hong)箱中(zhong)烘(hong)幹1小時，放(fang)入幹燥器中(zhong)冷(leng)卻至(zhi)室(shi)溫(wen)(約 45-60分(fen)鐘)後(hou)稱重(zhong)，準確至(zhi)0.0001g，再烘(hong)30分(fen)鐘，冷(leng)卻、稱(cheng)重(zhong)，直(zhi)至(zhi)恒重(zhong)。抽提瓶增(zeng)加(jia)的(de)重(zhong)量(liang)即(ji)為粗(cu)脂(zhi)肪的(de)重(zhong)量(liang)。抽出(chu)的(de)油(you)應是清亮的(de)，否(fou)則(ze)應重(zhong)做。